關(guān)于聚合酶的聚合作用有想知道的嗎?

 
　　聚合酶又稱多聚酶。是專門生物催化合成脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一類酶的統(tǒng)稱。1957年，美國科學(xué)家阿瑟·科恩伯格(ArthurKornberg)發(fā)現(xiàn)。可以識(shí)別修飾的NTP，例如生物素標(biāo)記、高辛標(biāo)記、熒光素標(biāo)記的NTP，可以用于各種標(biāo)記RNA的合成。同時(shí)對(duì)于T7啟動(dòng)子有高度的特異性。
　　是一種高度特異識(shí)別T7啟動(dòng)子序列的DNA依賴的5'→3'RNA聚合酶。T7RNAPolymerase可以催化單鏈或雙鏈DNAT7啟動(dòng)子下游NTP的摻入，合成與T7啟動(dòng)子下游的模板DNA互補(bǔ)的RNA。用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：雜交探針，基因組DNA序列分析，核糖核酸酶保護(hù)測(cè)定(RNaseprotectionassay)，反義RNA合成，作為體外翻譯的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)和RNA-蛋白質(zhì)相互作用，核酸擴(kuò)增分析，siRNA、miRNA等小RNA。
　　聚合酶的聚合作用：
　　在引物RNA'-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個(gè)將核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現(xiàn)為新進(jìn)入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對(duì)時(shí)才有催化作用。dNTP進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)后，可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化，促進(jìn)3'-OH與5'-PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。若是錯(cuò)誤的核苷酸進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)，則不能與模板配對(duì)，無法改變酶的構(gòu)象而被3'-5'外切酶活性位點(diǎn)所識(shí)別并切除之。